紫外分光光度計通常用作物質鑒定、純度檢查,有機分子結構的研究。在定量方面,可測定結構比較復雜的化合物和混合物中各組分的含量,也可以測定物質的離解常數,絡合物的穩定常數,物質分子量鑒別和微量滴定中指示終點以及在高效液相色譜中作檢測器等。
一、紫外分光光度計的技術原理:
物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。
二、紫外分光光度計的組成:
各種型號的紫外-可見分光光度計,就其基本結構來說,都是由五個基本部分組成,即光源、單色器、吸收池、檢測器及信號指示系統。
1、光源
在紫外可見分光光度計中,常用的光源有兩類:熱輻射光源和氣體放電光源。熱輻射光源用于可見光區,如鎢燈和鹵鎢燈;氣體放電光源用于紫外光區,如氫燈和氘燈。
2、單色器
單色器的主要組成:入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準直鏡等部分。單色器質量的優劣,主要決定于色散元件的質量。色散元件常用棱鏡和光柵。
3、吸收池
吸收池又稱比色皿或比色杯,按材料可分為玻璃吸收池和石英吸收池,前者不能用于紫外區。吸收池的種類很多,其光徑可在0.1~10cm之間,其中以1cm光徑吸收池較為常用。
4、檢測器
檢測器的作用是檢測光信號,并將光信號轉變為電信號?,F今使用的分光光度計大多采用光電管或光電倍增管作為檢測器。